Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Комбинированная окраска люксоловым прочным синим MBSN и левафиксовым красно-фиолетовым E-2BL миелина и глиальных волокон [Waldrop, Putcher, 1975] — Микроскопическая техника в биологии и медицине

Комбинированная окраска люксоловым прочным синим MBSN и левафиксовым красно-фиолетовым E-2BL миелина и глиальных волокон [Waldrop, Putcher, 1975]

1. Депарафинируют срезы в ксилоле и проводят через абсолютный спирт до 95%-ного спирта.
2. Окрашивают в растворе люксолового прочного синего MBSN в течение ночи при 55—60° (растворяют 1 г красителя в 1 л 95%-ного этанола и добавляют 5 мл 10%- ного раствора уксусной кислоты, перед употреблением профильтровывают; этот раст­вор стабилен).
3. Промывают 95%-ным этанолом для удаления избытка красителя.
Дифференцируют сначала 0,05%-ным раствором LiCO3, а затем . 70%-ным эта­нолом по несколько секунд до тех пор, пока глиальные волокна будут неокра­шенными.
4. Промывают в дистиллированной воде 5 мин.
5. Окрашивают в 0,25%-ном растворе левафиксового красно-фиолетового Е-2В в 0,25%-ной уксусной кислоте 2 ч при 55-60° (краситель добавляют в нагретую кислоту непосредственно перед погружением препаратов; этот раствор нестабилен).
6. Быстро промывают в трех сменах дистиллированной воды, обезвоживают в трех сменах абсолютного этанола, просветляют в ксилоле и заключают в синтетическую среду.

Миелин окрашивается в синий цвет, глиальные волокна, отростки эпендимальных клеток и ядра — в красно-фиолетовый цвет.

Примечание.
1. При комнатной температуре левафиксовый краситель окрашивает менее избирательно многие ткани, имея особое сродство к коллагену. Неселективная окраска уменьшается с повышением температуры. С увеличением концентрации левафиксового красителя интенсивность окраски глиальных волокон уменьшается, возможно, из-за усиливающейся агрегации кра­сителя.

Arch Pathol. 1975 Oct; 99(10):529-32.
Luxol Fast Blue MBSN-Levafix Red Violet E-2BL. A combined stain for myelin sheaths and glia fibers.
Waldrop FS, Puchtler H.

Abstract
During investigations of reactive dyes, Levafix Red Violet E-2BL was found suitable for staining of glia fibers. Experiments were carried out on 37% formaldehyde-fixed human autopsy material. Paraffin sections were treated with Luxol Fast Blue MBSN as usual, differentiated until glia fibers were decolorized, and counter-stained in a 0.25% solution of Levafix Red Violet E-2BL in 0.25% acetic acid. Myelin sheaths were colored blue. Gila fibers, smooth muscle cells, and nuclei were stained red violet. Axons and connective tissue remained unstained; occasionally, coarse bundles of collagen showed patchy coloration. Polarization microscopic studies proved that Levafix Red Violet E-2BL is bound to well-oriented fibrous proteins in glia fibers. The similar staining and polarization microscopic properties of glia fibers and smooth muscle support previous findings that glia fibers contain a myosin-like protein.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Сообщить об опечатке

Текст, который будет отправлен нашим редакторам: